Essai n° 454A : Essai de transactivation du récepteur des glucocorticoïdes humain

La Ligne directrice d'essai décrit l'essai de transactivation (TA) du récepteur des glucocorticoïdes (GR) humain permettant de détecter les agonistes (activation) et les antagonistes (inhibition) du GR. Le GR est un facteur de transcription activé par une hormone appartenant à la superfamille des récepteurs nucléaires aux hormones stéroïdiennes. Différentes formes de ce récepteur sont exprimées de manière ubiquitaire dans presque toutes les cellules de l’organisme. Le GR est impliqué dans un large éventail de processus physiologiques essentiels, notamment la régulation de la réponse au stress, de la fonction immunitaire, de l’inflammation et du métabolisme. Une lignée cellulaire (appelée HMLN-hGR) transfectée de manière stable avec un gène rapporteur luciférase sous le contrôle du GR lié à un ligand ou à une substance chimique a été développée et forme la base de cet essai GRTA human permettant de détecter à la fois les agonistes du GR (activation) et les antagonistes (inhibition). L’activation du GR par un ligand entraîne la transcription du gène de la luciférase, qui peut ensuite être mesurée par émission de lumière lorsque son substrat, la luciférine, est converti en oxyluciférine par la luciférase exprimée. L’activation transcriptionnelle est mesurée en évaluant la relation concentration–réponse des substances chimiques testées dans des conditions d’agoniste. Les antagonistes peuvent être détectés en mode antagoniste, où les substances sont testées en présence d’un agoniste.